Yol Gösterici Teknoloji Size Basit ve Etkili Tuzdan Arındırma ve Konsantrasyon Yöntemini Öğrenmenizi Sağlıyor
Proteinlerin genellikle ayırma ve saflaştırmadan sonra tuzundan arındırılması gerekir ve bu tuzlar esas olarak canlı organizmalardaki çeşitli iyonlardan (örn. sodyum iyonları, potasyum iyonları, klorür iyonları vb.) ve ayrıca ekstraktlardaki tampon tuzlarından, proteinlerdeki tuzlardan türetilir. elüentler ve deneyler için kullanılan belirli denatüranların tuz bileşenleri. Yüksek tuz konsantrasyonu, proteinlerin aktivitesini ve stabilitesinin yanı sıra diğer moleküllerle etkileşimlerini de etkileyebilir, girişim sinyalleri üretebilir veya elektroforez, kütle spektrometrisi ve kristalografik çalışmalar gibi sonraki analitik yöntemlerde ölçümlerin doğruluğunu azaltabilir. Bu nedenle, saflaştırılmış proteinlerin ayırma sonrasında tuzdan arındırılması çok gereklidir ve sıklıkla kullanılan ana tuz giderme yöntemleri membran (diyaliz ve ultrafiltrasyon) ve jel filtrasyon kromatografisidir. Ayrıca bazı durumlarda seyreltme yoluyla da tuzdan arındırma işlemi gerçekleştirilebilir.
Diyalizle tuzdan arındırma, uzun döngü ve çok sayıda yedek sıvıya duyulan ihtiyaç nedeniyle, uygulaması büyük ölçüde kısıtlanmıştır ve endüstride daha az kullanılmaktadır, ancak çoğunlukla kısmen laboratuvarda kullanılmaktadır; laboratuvarda da yavaş yavaş ultrafiltrasyon tüpleri kullanılmaktadır. /ultrafiltrasyon kabı.
Protein tuzdan arındırma ve konsantrasyon sürecinde kullanılan ana membran ayırma teknolojisi ultrafiltrasyondur. Ultrafiltrasyon, yüksek verimlilik, düşük enerji tüketimi, faz değişimi yok, herhangi bir kimyasal reaktif eklemeye gerek yok, kolay kullanım, yumuşak koşullar, biyolojik makromoleküllerin aktivitesini daha iyi koruyabilme yeteneği, yüksek geri kazanım oranı ve diğer avantajlara sahip bir membran ayırma teknolojisidir. ve protein ayırma ve saflaştırmada kullanımının benzersiz avantajları vardır.
Ultrafiltrasyon, ayırma ortamı olarak gözenekli bir membran kullanan ve çözeltideki farklı molekül ağırlıklarına sahip maddeleri ayırmak için itici güç olarak membranın iki tarafı arasındaki basınç farkına dayanan, dolayısıyla tuzdan arındırma, konsantrasyonda rol oynayan bir membran filtrasyon yöntemidir. ve saflaştırma. Bu, son yıllarda geliştirilen ve başta proteinler ve enzimler olmak üzere biyolojik makromoleküllerin konsantrasyonu veya tuzdan arındırılması için en uygun olan yeni bir yöntemdir. Ultrafiltrasyon uygulamasının anahtarı membran seçimidir, membranın farklı tipleri ve özellikleri, su akış hızı, moleküler ağırlık kesme ve diğer parametrelerde farklılık vardır, ilgili iş ihtiyaçlarına göre seçilmelidir. Ayrıca ultrafiltrasyon cihazının şekli, çözünen maddenin bileşimi ve özelliği, çözelti konsantrasyonu vb. ultrafiltrasyonun etkisi üzerinde belirli bir etkiye sahiptir.
Proteinlerin saflaştırma prosesinde proteinlerin tuzdan arındırılması ve konsantre edilmesi için ultrafiltrasyon teknolojisinin uygulanması, birkaç yüz ila birkaç bin litre arasında değişen büyük miktarlardaki sıvıların işlem kolaylığı, zaman tasarrufu avantajlarıyla birlikte işlenmesine uygunluğu ile karakterize edilir. ve yüksek protein geri kazanım oranı. Ultrafiltrasyon yöntemi, laboratuvar mikro hacimli işleme için ultrafiltrasyon tüplerinden, küçük hacimli işleme için ultrafiltrasyon kaplarından ve endüstriyel kullanıma yönelik ultrafiltrasyon sistemlerinden olgunlaştırılmıştır.
Ultrafiltrasyon, doğrudan basınçlı ultrafiltrasyon ve teğetsel akış filtrasyonuna bölünmüştür ve şu anda, teğetsel akış filtrasyonu esas olarak endüstride tuzdan arındırma ve tampon değiştirmede yaygın olarak kullanılmaktadır.
Aşağıda Guidling Technology'nin ultrafiltrasyon membran kasetlerinin protein tuzdan arındırma ve konsantrasyonunda uygulanmasına bir örnek verilmiştir.
0,2 mg/mL konsantrasyonda 500 mL PEG ile modifiye edilmiş büyüme hormonu çözeltisinin tuzunu almak ve konsantre etmek için bir {{{0}}.11㎡ 10 kd gözenek boyutunda membran kaseti (G01100010K) kullandık. Ultrafiltrasyon işlemi boyunca tuzdan arındırma oranı, protein geri kazanım oranı, membran akışı arıza durumu ve su akışı geri kazanım oranı incelendi.
Kullanımdan önce ve sonra, membran kasetinin su akışını ayrı ayrı test ettik ve aynı besleme hızı, besleme basıncı ve geri akış basıncının korunması öncülüğünde membran kasetlerinin geri kazanım oranı %98'e ulaştı.
Tüm süreç toplam 2L malzeme işledi ve 40dk, 0-5dk konsantrasyon süreci, 5-35dk sıvı değişim süreci ve 35-40dk sürdü aşırı konsantrasyon süreciydi. Ultrafiltrasyon işlemi boyunca TMP, 0.7-0.8 bar arasında stabilize edildi, besleme hızı sabitti ve ortalama malzeme akışı 27 LMH idi.
2L malzeme konsantre sıvı değişimi 60 mL'ye, yaklaşık 33 kat konsantre, tuzdan arındırma oranı %99'a ulaşır, geri kazanım oranı %80'e ulaşır, yıkamadan sonra 50 mL sıvı artışı, toplam geri kazanım %88, endüstriyel üretime göre Boru hattı hesaplamalarının ölü hacmi, üst yıkama sayısını mümkün olduğu kadar artırmak için, genel üst yıkama 3 kez tamamen geri kazanılabilir.
Guidling Teknolojisi membran kasetleri, güçlü korozyon direncine sahip tıbbi sınıf inert malzemelerden yapılmıştır ve güçlü alkali temizlemeye dayanabilir; otomatik üretim sürecinin kullanılması ürünün sürekliliğini ve kalite güvenilirliğini, daha yüksek mekanik mukavemeti, karşı basınç direncini ve tekrarlanan durulama performansını sağlar; membrana daha yüksek akış ve daha düşük protein adsorpsiyonu sağlayabilen süper hidrofilikliğe sahiptir; ayrıca malzeme transferini kolaylaştıran ve filtreleme süresini önemli ölçüde kısaltan, daha küçük basınç düşüşüne sahip optimize edilmiş bir akış kanalı tasarımına sahibiz.
Membran kasetlerimiz 1kd'den 1000kd'ye kadar çok çeşitli gözenek boyutlarında mevcuttur. Bunlar arasında, 1-10kd ultrafiltrasyon membran kasetleri tuzdan arındırma ve pirojen giderme için kullanılabilir; 30kd ultrafiltrasyon membran kasetleri monoklonal antikor konsantrasyonu ve tampon değişimi için kullanılabilir; Aynı zamanda içi boş fiber ürünlerimiz, esas olarak aşı ürünlerinde çok sayıda uygulamada kullanılan 100kd, 300kd ve 500kd gözenek boyutlarına sahip biyolojik maddelerin konsantrasyonu ve değiştirilmesi için de kullanılabilir.
Guidling Technology, biyofarmasötikler, hücre kültürü, biyomedikalin saflaştırılması ve konsantrasyonu, teşhis ve endüstriyel sıvılara odaklanan ulusal bir yüksek teknoloji kuruluşudur. Biyofarmasötikler, hücre kültürü vb. uygulama senaryolarını tam olarak karşılayan santrifüj filtre cihazlarını, ultrafiltrasyon ve mikrofiltrasyon kasetlerini, virüs filtresini, TFF sistemini, derinlik filtresini, içi boş fiberi vb. başarıyla geliştirdik. Membranlarımız ve membran filtrelerimiz, ön filtreleme, mikrofiltrasyon, ultrafiltrasyon ve nanofiltrasyonun konsantrasyonu, ekstraksiyonu ve ayrılmasında yaygın olarak kullanılmaktadır. Küçük, tek kullanımlık laboratuvar filtrelemesinden, üretim filtreleme sistemlerine, sterilite testlerine, fermantasyona, hücre kültürüne ve daha fazlasına kadar birçok ürün grubumuz, test ve üretim ihtiyaçlarını karşılamaktadır. Guidling Technology sizinle işbirliği yapmayı dört gözle bekliyor!
