CM Zayıf İyon-Değişim Membran Kromatografisi

SP Güçlü Katyon Değişimi Membran Kromatografisi Ürün Tanıtımı 

 

2. Ürün Avantajları

Hızlı ve Verimli Yüksek bağlama kapasitesine, geleneksel reçine kromatografisinden 40 kata kadar daha hızlı akış hızlarında ulaşılabilir. Geleneksel reçine-bazlı kromatografiyle karşılaştırıldığında, membran kromatografisinin kullanıldığı işlem süresi 30-40 kat azaltılabilir. Tipik çalışma akış hızı yaklaşık 10 MV/dak'dır.

2.2 Yüksek Bağlanma Verimliliği Membran kromatografisi, düşük basınç düşüşünde yüksek bağlama kapasitesi ve yüksek akış hızları sergileyerek yüklü biyomoleküllerin modülden tek bir geçişte yakalanmasına olanak tanır.

2.3 Ölçeklenebilir ve Esnek Membran kromatografi ürünlerinin tamamı, süreç geliştirmeden büyük-ölçekli üretime kadar uygulamaları kapsayan biyomolekül saflaştırmanın çeşitli ihtiyaçlarını karşılayabilir. Kapsül tasarımı tek kullanımlık kullanıma olanak tanır- veya uygun temizleme prosedürlerinden sonra temizlenip yeniden kullanılabilir.

2.4 Geliştirilmiş Üretkenlik Kompakt tasarım, tesisin kapladığı alanı en aza indirir. Sütun paketleme, temizleme, temizleme doğrulaması ve sütun depolama gibi işlemleri ortadan kaldırarak işleme, nispeten daha az tamponla basit dengeleme sonrasında başlanabilir. Kolon paketleme, temizleme veya depolamaya gerek olmadığından işçilik maliyetleri %50'den fazla azaltılabilir.

 

 

3 Teknik Parametre

3.1 Yapısal Malzemeler

	Laboratuvar ölçeği	küçük ölçekli	pilot ölçekli	üretim ölçeği
membran hacmi	0.2ml	5 ml	140 ml	5L
Membran Destek Yapısı	Polipropilen
membran muhafazası	Polipropilen
O halka	Silikon

3.2 Çalışma Özellikleri

	Laboratuvar ölçeği	küçük ölçekli	pilot ölçekli	üretim ölçeği
membran hacmi	0.2ml	5 ml	400ml	5L
Önerilen akış hızı	1-6ml/dak	25-150ml/dak	2-12L/dak	25-150L/dak
Maksimum çalışma sıcaklığı	35 derece
Maksimum çalışma basıncı	3bar(25 derece)
Maksimum basınç farkı	3bar(25 derece)
Saklama koşulları	20% eilahiaendişelisoluşum

Karşılaştırma, SP membran kromatografisinin hizmet ömrünün SP Sepharose 6FF'ninkiyle karşılaştırılabilir olduğunu göstermektedir.

Şekil 1. Lizozim ile Test Edilen Çoklu Kullanım Sonrası SP Membran Kromatografisinin Bağlanma Kapasitesi Değişiklikleri

Ek olarak, konakçı hücre proteinlerinin ve nükleik asitlerin uzaklaştırılmasındaki etkinliği açısından membran kromatografisini değerlendirdik. Sonuçlar aşağıdaki gibidir:

	DNA				HCP
	IgG Kurtarma	RT PCR ile içerik (pg/mg IgG)		Kaldırma Faktörü	İçerik(ng/mg of IgG)Elisa'ya ait		Kaldırma Faktörü
Koşmak	%	Q Membrandan Önce	Q Membran'dan sonra	Kayıt	Q Membrandan Önce	Q Membran'dan sonra	Kayıt
1	96.4	423	3.6	2.07	7	4.3	0.21
2	97.4	438	4.3	2.01	7	4.7	0.17
3	94.1	513	5.8	1.95	6	2.3	0.42
4	96.2	32	0.8	1.60	6	3.2	0.27
5	96.3	45	1.9	1.37	8	3.4	0.37
6	96.7	158	2.4	1.82	8	3.5	0.36
7	96.4	267	2.6	2.01	9	6	0.18
8	96.8	298	3.6	1.92	9	7	0.11
9	97.9	746	9.8	1.88	4	1.5	0.43
10	96.2	39	3.2	1.09	4	1.4	0.46

Tablo 1. SP Membran Kromatografisi Kullanılarak CHO-Eksprese Edilen IgG Malzemesinde DNA ve Konakçı Hücre Proteini Giderme Oranları

Bir dizi deney, SP membran kromatografisinin, hedef IgG'nin yüksek geri kazanım oranını korurken kirletici maddeleri etkili bir şekilde çıkarabildiğini gösterdi.

Gudiling SP membran kromatografisini ithal markalarla karşılaştırırken bağlama kapasitesi verileri aşağıdaki gibidir:

bağlayıcıckapasite (mg/ml)	Sartorius	PALL	rehberlik
Lizozim	25	32	29
Tripsin	22	27	25

Tablo 2. Ürünümüzdeki ve Rakip Markalardaki Farklı Proteinlerin Bağlanma Kapasitesi Performansı

Genel değerlendirme, bağlama kapasitemizin ithal ürünlerle karşılaştırılabilir düzeyde olduğunu gösteriyor.

Şekil 2. Lizozimin Standart Olarak Kullanıldığı SP Membran Kromatografi Modülünün Bağlanma Kapasitesi Testi

Dinamik bağlanma kapasitesi ve ithal ürünlerle karşılaştırıldığında, lizozim 190 mM NaCl'de elüt edildiğinde çoğu hedef proteinin yakalanabileceği doğrulandı.

Farklı elüsyon koşulları aracılığıyla, membran kromatografisinin elüsyon profillerinin agaroz jelin elüsyon profillerine benzer olduğunu ancak proteinlerin saflığının farklı tuz konsantrasyonlarında önemli ölçüde değiştiğini bulduk. Gerçek Ar-Ge ve üretimde, yüksek-saflıkta hedef proteinler elde etmek için optimal elüsyon koşullarının niceliksel olarak belirlenmesi gerekir.

 

4 Tipik Uygulama Durumu

DNA'nın, virüslerin ve konakçı hücre proteinlerinin çıkarılması

Plazmidlerin, virüslerin, proteinlerin yakalanması ve oligonükleotidlerin saflaştırılması

Maya fermantasyon et suyundan pigmentlerin çıkarılması ve yüksek-kapasiteli protein yakalama

 

5 Kullanım Prosedürü

5.1 Ekipman Hazırlama ve Montajı:

5.1.1:Membran kromatografi modülünü, reçine kolonlarına benzer prosedürleri izleyerek, akış yönünün modülün okları ve giriş yönü ile hizalandığından emin olarak bir ÄKTA kromatografi sistemi üzerine kurun. Sisteme güvenli entegrasyon için modülü Luer kilitleri veya kelepçe-tarzı bağlantı elemanlarını kullanarak bağlayın.

5.1.2 Besleme akış hızını şu şekilde ayarlayın:5–10 MV/dakve dengeleme tamponunu kullanarak modülün gazını giderin ve atık suyun hava kabarcığı içermediğinden emin olun. Gazdan arındırıldıktan sonra süzüntü çıkışını kromatografi sistemine bağlayın.

5.2:-Kullanım Öncesi Tedavi:

5.2.1:

Besleme akış hızını şu şekilde ayarlayın:5–10 MV/dakve ön-tedaviyi şu şekilde gerçekleştirin:5 MV'den fazlası için 0,5 M NaOHMembranın tam dengeye ulaşması sağlanır.

5.2.2: Aynı akış hızında, ön-işlemeyi şu şekilde gerçekleştirin:5 MV'den fazlası için 1 M NaClMembranın tam dengeye ulaşmasını sağlamak.

5.3 Kromatografi Süreci

5.3.1 Besleme akış hızını 5-10 MV/dak'ya ayarlayın ve membran tam dengeye ulaşana kadar membranı 5 MV'den fazla dengeleme tamponuyla dengeleyin.

5.3.2 0,22 μm ön-filtrasyondan sonra, numune yükleme tamamlanana veya kromatografik bağlanma kapasitesine ulaşılana kadar numuneyi membrana yükleyin.

5.3.3 UV sinyali taban çizgisine dönene kadar 10 MV'den fazla dengeleme tamponu ile yıkayın.

5.3.4 Proses tasarımına göre gradyan elüsyon veya kademeli elüsyon uygulayın ve fraksiyonları gerektiği gibi toplayın.

5.4 CIP Sonrası-Arıtma Kullanımı – Membran Kromatografi Cihazı CIP (Yerinde Temizleme)

5.4.1 Besleme akış hızını 5–10 MV/dak'ya ayarlayın ve UV sinyali taban çizgisinin altına düşene kadar 10 MV'den fazla 1 M NaOH ile temizleme yapın.

5.4.2 30 dakika boyunca sirkülasyondan sonra, pH 7-8'e ulaşana kadar suyla yıkamaya geçin, ardından iletkenlik neredeyse sabit hale gelinceye kadar %20 etanol ile temizlemeye devam edin.

5.5 Membran Kromatografi Depolaması

Kullanımdan ve CIP'nin tamamlanmasından sonra, membran modülü çıkarılabilir ve %20 etanolde ıslatılarak saklanabilir veya %20 etanol içeren bir çözelti içinde oda sıcaklığında sıra halinde-saklanabilir. %20 etanol solüsyonu periyodik olarak kontrol edilmeli ve değiştirilmelidir.

 

6. Sipariş bilgileri

Q Güçlü Anyon Değişim Membran Kromatografi Kapsül Filtresi

	Laboratuvar ölçeği	küçük ölçekli	pilot ölçekli	üretim ölçeği
Ürün Modeli	IEXQ0002ES	IEXQ0050ES	IEXQ0400ES	IEXQ5000ES
Membran Hacmi	0.2ml	5 ml	400ml	5L

Popüler Etiketler: cm zayıf iyon-değişim membran kromatografisi, Çin, tedarikçiler, üreticiler, fabrika, toptan satış, toplu, stokta, ücretsiz numune