Ultrafiltrasyon tüpünün bakım ve kullanım yöntemi

Ultrafiltrasyon tüpünün bakım ve kullanım yöntemi

Ultrafiltrasyon tüpünün işlevi:

1) Konsantrasyon; 2) Tuzdan arındırma; 3) Tamponu değiştirin; 4) Kısmi arınma etkisine sahiptir.

1. Yeni ultrafiltrasyon tüpü, başka bir işleme tabi tutulmadan doğrudan kullanılabilir;

2. Ultrafiltrasyon tüpü yüksek sıcaklıkta sterilize edilemez;

3. Konsantre protein değiştirilirken ultrafiltrasyon tüpünün tedavisi

Ultrafiltrasyon tüpü yeniden kullanılabilir. 1-2 saat 0.1M NaOH içinde bekletin, suyla yıkayın ve ardından yeni proteini konsantre etmek için kullanılabilen ilgili solüsyonla (sterilize su veya PBS) santrifüjde 3 kez yıkayın;

4. Normal yerleştirilmiş ultrafiltrasyon tüpünün tedavisi

Sık kullanılan ultrafiltrasyon tüpü için, 1-2 saat 0.1M NaOH içinde bekletin, suyla yıkayın ve sterilize edilmiş suda bekletin. Filtre membranını ıslak tuttuğunuzdan ve bakterilerin büyümesini engellediğinizden emin olun;

5. Uzun süre yerleştirilen ultrafiltrasyon tüpünün tedavisi

Ultrafiltrasyon tüpü uzun süre kullanılmayacaksa, 1-2 saat 0.1M NaOH'de bekletin, suyla yıkayın ve saklama için yüzde 20 etanolde ıslatın. Filtre membranını ıslak tuttuğunuzdan ve bakterilerin büyümesini engellediğinizden emin olun;

6. Ultrafiltrasyon tüpü için kullanılan santrifüj hızı

Santrifüj hızı genellikle 4000 rpm'dir (genellikle 3000g önerilir ve maksimum 4000g'yi aşamaz). 5-8 dakika santrifüj edildikten sonra, 4 ml numune 1 ml'den daha az ila düzinelerce mikrolitreye konsantre edilebilir; Hız çok yüksekse, hedef protein düşerek hedef proteinin kaybolmasına neden olur; Düşük hız, zaman alıcı ve düşük iş verimliliği;

7. Tabanca başlığı ultrafiltrasyon tüpüne uzandığında alınacak önlemler

Ultrafiltrasyon tüpüne protein solüsyonu veya tampon eklerken mavi tabanca başlığı kullanılabilir; Ancak, konsantre hedef protein ultrafiltrasyon tüpünün altından emildiğinde sarı tabanca başlığı kullanılmalıdır; Tabanca başlığı ultrafiltrasyon tüpüne yerleştirildiğinde, filtre zarının delinmesini önlemek için filtre zarına dokunması önlenmelidir;

8. Ultrafiltrasyon tüpünün protein adsorpsiyon kaybını azaltın

Ultrafiltrasyon tüpünün zarı, hedef proteini yaklaşık yüzde 30 oranında azaltacak olan proteini adsorbe edebilir; Protein kaybını azaltmak için, hedef protein çözeltisini emdikten sonra, filtre membranı tarafından adsorbe edilen proteinin çoğunu yıkamak ve hedef protein kaybını azaltmak için ultrafiltrasyon tüpünün altını protein tamponu ile temizleyin; Saflaştırılmış protein konsantre ise konsantre hacmin çok küçük olmamasına dikkat edin; Genel olarak, ne kadar santrifüjlenirse edilsin, altta yaklaşık 200 µL protein solüsyonu tutulacaktır;

9. Ultrafiltrasyon tüpünün arızası nasıl tanımlanır

Normal kullanımda, filtre membranı delinmediğinde, konsantre protein solüsyonu protein içermez veya miktarı çok düşüktür (hedef protein dahil), ilk filtrelenen solüsyon hedef protein içerirken, filtre membranının geçersiz olduğunu ve yeni bir ultrafiltrasyon tüpü ile değiştirilmesi gerekir.