Santrifüj Filtre Cihazları hakkında SSS

Q1. Farklı moleküler ağırlıktaki proteinleri ayırmak gerekir, peki proteinlerin moleküler ağırlıklarının ne kadar farklı olması gerekir?

C: İki proteinin boyutunun 10 kat veya daha fazla farklılık göstermesi gerekir.

 

Q2. Santrifüj edebiliralfiltre cihazları sterilize ve alkali yıkamaya dayanıklı mı?

A: Yüzde 75 etanol sulu solüsyonu ile sterilize edilebilir ve zar 0.1-0.5N sodyum hidroksit alkali yıkamaya dayanabilir.

 

Q3. Konsantrasyon sırasında protein çökerse nasıl başa çıkılır?

A: Protein çok hızlı konsantre edilirse veya çok konsantre edilirse, protein çökelmesine neden olabilir ve konsantrasyondan sonra proteinin son konsantrasyonu çok yüksek olmamalıdır; Konsantrasyon hızına duyarlı ve çökelme eğiliminde olan proteinler, önerilen iyileştirme yöntemi:

Santrifüj hızını azaltın

Daha yüksek bir moleküler ağırlık kesme özelliğine sahip ultrafiltrasyon membranı kullanın

Konsantre tüpe üfleyin ve emin ve ardından santrifüjleyin

 

Q4. olmasının olası nedeni nedir?santrifüj filtre cihazlarıaşağı santrifüj edilemez mi?

A: Ultrafiltrasyon tüpü santrifüjlenemezse, ilk santrifüjleme için yaklaşık yüzde 20 etanol sulu solüsyonu kullanabilirsiniz, çünkü ultrafiltrasyon membranı tamamen kurudur, membranın yüzeyi zayıf bir şekilde hidrofobiktir ve akı, infiltrasyondan sonra düşük bir oranda geri yüklenebilir. yüzey gerilimi çözücüsü.

 

Q5. Santrifüj filtre cihazlarının doğru kullanım yöntemleri ve saklanması

A: Santrifüj filtre cihazları, bütünlüğünü doğrulamak için kullanılmadan önce saf su ile santrifüj edilmelidir. Her kullanımdan sonra membranın kurumaması için ıslak halde muhafaza edilmesi gerekmektedir.

 

Q6. Santrifüj filtre cihazları endotoksini nasıl giderir?

C: Sağladığımız santrifüjlü filtre cihazları endotoksinlerle işlenmemiştir ve endotoksinler doğada yaygın olarak bulunduğundan, endotoksin gerektiren numuneler deneyden önce 0.5N sodyum hidroksit ile önceden temizlenebilir ve ardından Endotoksinin çoğunu çıkarmak için RO suyu.

 

Q7. Konsantre protein aşağı akış analizi için kullanıldığında, girişim olduğu bulundu, nedeni nedir?

A: Santrifüj filtre cihazları, tampon solüsyonu veya arıtılmış su ile önceden yıkanabilir. Girişim hala devam ediyorsa, 0.1N sodyum hidroksit ile yıkayın ve ardından saf su ile yıkayın.

 

Q8. It Konsantrasyondan sonra konsantrede hedef protein olmadığı bulunmuştur. Olası nedenler nelerdir?

C: 1) Proteinin başlangıç ​​konsantrasyonu çok düşük olmamalıdır, eğer konsantrasyon çok düşükse, zar tutmayabilir.

2) Uygun membran gözenek boyutunu seçin. Filtre tüpünün santrifüj konsantrasyonu, çıkmaz filtrasyona aittir ve membran gözenek boyutu genellikle hedef proteinin 2 katından az veya daha fazladır.

3)Doğru santrifüj hızını seçin

4) Hedef proteinin çöküp çökmediği

 

Q9. Santrifüj filtre cihazlarının pasivasyon işlemi

A: Santrifüj filtre cihazlarının yüzeyinin pasifleştirme ön işlemi, membran yüzeyindeki protein adsorpsiyon kaybını azaltabilir, çoğu durumda, seyreltilmiş protein çözeltisini konsantre etmeden önce kolonun ön işlemi, geri kazanımı artırabilir, çünkü çözelti maruz kalanları doldurabilir. membran ve yüzeydeki boş protein adsorpsiyon bölgeleri, pasivasyon yöntemi, kolonu yüksek hacimli pasivasyon solüsyonuyla 1 saatten fazla önceden ıslatmak, kolonu damıtılmış suyla iyice yıkamak ve ardından kolonu bir kez damıtılmış suyla santrifüjlemektir. membran üzerinde kalabilecek pasivasyon solüsyonunu tamamen çıkarmak için, pasivasyondan sonra membranın kurumasına izin vermemeye dikkat edin, ileride kullanmak üzere saklamak isterseniz, membranı ıslak tutmak için steril distile su eklemeniz gerekir., lütfen iletişime geçin. Ortak pasivasyon çözümleri için mühendislerimiz.

 

Q10. Ultrafiltrasyon membranı molekülleri hiyerarşik olarak filtreliyor mu?

A: Generally speaking, if the dead-end filtration method is used, it is difficult to accurately remove small molecules among several large molecules by ultrafiltration method. This is because the membrane is a porous network structure, and its filtration mechanism is based on retention rather than passage, such as, the cut off rate of molecules larger than 100kd is >Bununla birlikte, 100kd'lik bir ultrafiltrasyon membranı kullanılıyorsa yüzde 95, membranın gözenek boyutundan daha küçük moleküller membrandan tamamen serbestçe geçemez. 67kd'lik moleküler tutma oranı yüzde 70'ten fazladır ve 43kd'lik protein de yüzde 40'tan fazladır, karışık bir çözeltideki çeşitli bileşenler zardan tek bileşenli bir çözelti kadar basit ve kolay geçmez. , iki makro molekülü izole etmek istiyorsanız, aralarındaki moleküler ağırlık farkı sekiz kat veya daha fazla olmalıdır.

 

Q11. Büyük ve küçük molekülleri ultrafiltrasyon yoluyla etkili bir şekilde nasıl ayırabilirim?

A: İşlemin ihtiyaçları nedeniyle, makromoleküllerdeki safsızlıklar giderilir veya küçük moleküller makromoleküllerden çıkarılır, üretimde normaldir. Uygun membran gözenek boyutunun, filtrasyon yönteminin ve çalışma koşullarının seçilmesi çok gereklidir. Genel olarak, zarın MWCO özelliği iki protein arasında seçilirse, nispeten ideal bir ayırma elde edilebilir. Protein solüsyonu nispeten seyreltik ise, düşük basınç altında çalışmak da daha iyi sonuçlar alınmasına yardımcı olacaktır. Teğetsel akış filtrasyonunu seçin ve daha iyi ayırma etkisi elde etmek için çoklu diyafiltrasyon gerçekleştirin.